Plasmide CRISPR/Cas9 KO LCRG1 (h): sc-410137

Présentation

GGNBP2 (également connu sous le nom de LCRG1) code une protéine nucléaire impliquée dans la régulation transcriptionnelle et le maintien des programmes de contrôle de la croissance cellulaire. Les fonctions rapportées associent LCRG1 à la modulation de la progression du cycle cellulaire, à des processus liés à la chromatine et à une régulation, dépendante du contexte, des voies de prolifération et de différenciation. Une expression altérée de GGNBP2/LCRG1 a été observée dans de nombreux types de cancers, ce qui soutient son intérêt comme cible de recherche pour l’étude de la signalisation oncogénique, de la stabilité du génome et des réseaux transcriptionnels associés aux tumeurs. Dans des modèles cellulaires humains, la perturbation de GGNBP2 peut aider à disséquer, au niveau des voies, les effets sur la prolifération, l’apoptose et les programmes d’expression génique spécifiques de lignée.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO LCRG1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène GGNBP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du GGNBP2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert GGNBP2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine LCRG1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en GGNBP2 pour l'étude de la signalisation de LCRG1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de GGNBP2 essentiels à la fonction de LCRG1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de GGNBP2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le LCRG1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le LCRG1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus GGNBP2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le LCRG1 plasmide HDR (h) et le LCRG1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie GGNBP2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles GGNBP2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.