Plasmide Double Nickase (m) LASP-1: sc-421388-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LASP-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LASP-1 Double Nickase (m) et le plasmide LASP-1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Lasp1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LASP-1 Antibody (G-7): sc-374059
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LASP-1 | sc-421388-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) LASP-1 | sc-421388-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lasp1 code la protéine 1 à domaines LIM et SH3 (LASP-1), un adaptateur se liant à l’actine, enrichi au niveau des adhérences focales, des lamellipodes et des replis membranaires, où il contribue à coordonner le remodelage du cytosquelette et la motilité cellulaire. Par ses interactions avec des protéines associées à l’actine et des complexes de signalisation, LASP-1 participe à la dynamique d’adhérence, à la migration et aux voies de mécanotransduction liées à l’engagement avec la matrice extracellulaire. Dans les modèles murins, l’activité de Lasp1 est souvent étudiée dans des contextes de comportements épithélio-mésenchymateux, de réparation des plaies et de remodelage tissulaire, où les modifications des programmes d’adhérence et d’invasion sont marquées. Des altérations de l’expression et de la localisation de LASP-1 ont été associées à une migration dérégulée et à une signalisation proliférative anormale dans plusieurs modèles pertinents pour la maladie, ce qui en fait une cible utile pour étudier le contrôle du cytosquelette et des phénotypes de type métastatique.
LASP-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Lasp1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Lasp1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Lasp1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Lasp1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.