LARP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414019

概要

リボヌクレオタンパク質ドメインファミリーのメンバー4（LARP4）は、ポリ(A)結合タンパク質と会合し、細胞質においてmRNAの安定性および翻訳効率を制御するRNA結合タンパク質です。mRNP複合体や翻訳装置との相互作用を介して、LARP4は転写後の遺伝子発現制御に影響を及ぼし、タンパク質産生量や増殖・ストレス刺激への細胞の適応を左右します。これらの機能により、転写産物の運命や翻訳制御の下流変化を通じて、細胞増殖、遊走、細胞骨格ダイナミクスを制御する経路とも結び付けられます。RNA代謝および翻訳の破綻は、複数のがんや神経発達関連の状況で繰り返し見られる特徴であるため、LARP4は疾患関連の遺伝子発現プログラムの機構研究に有用な結節点（ノード）となります。

LARP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLARP4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LARP4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LARP4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LARP4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LARP4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LARP4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LARP4の機能に不可欠なLARP4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LARP4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LARP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLARP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LARP4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LARP4 HDRプラスミド（h）および LARP4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLARP4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLARP4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。