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Laminin β-1双切口酶质粒(h) | sc-401105-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Laminin β-1双切口酶质粒(h2) | sc-401105-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LAMB1 编码层粘连蛋白 β1(laminin β-1),是多种层粘连蛋白异源三聚体的核心亚基。这些三聚体组装形成基底膜,并组织细胞外基质的结构。通过与整合素(integrins)、肌营养不良糖蛋白(dystroglycan)及其他基质成分的相互作用,laminin β-1 支持细胞黏附、极性建立、迁移与存活,并影响黏着斑激酶(FAK)和 PI3K/AKT 等信号节点以及细胞骨架动力学。在人体组织中,LAMB1 有助于上皮与内皮的屏障功能,并指导包括神经突起生长与组织形态发生在内的发育过程。涉及 LAMB1 的层粘连蛋白组成改变或基底膜组装受损与先天性结构缺陷有关,并可在疾病相关模型中调节侵袭性与纤维化等表型。
Laminin β-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LAMB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LAMB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LAMB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LAMB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。