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KV4.2双切口酶质粒(h) | sc-402801-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KV4.2双切口酶质粒(h2) | sc-402801-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCND2 编码电压门控钾通道亚基 KV4.2。KV4.2 是快速失活的 A 型 K⁺ 电流的主要介导者,该电流在兴奋性细胞中塑造动作电位复极、放电频率以及树突兴奋性。KV4.2 的功能受通道复合体组装和多种信号输入调控,包括磷酸化以及与辅助蛋白的相互作用,这些因素共同调节通道门控特性、转运过程及其在细胞膜上的定位。通过控制细胞兴奋性与突触整合,KCND2 参与活动依赖性的神经元信号传递,并影响与心脏电生理相关的复极动力学。多项研究将 KCND2/KV4.2 的表达改变或通道性质异常与电信号传导障碍联系起来,包括神经发育异常与癫痫相关表型,以及在以电生理为重点的研究中提示的与心律失常相关的易感性。
KV4.2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 KCND2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KCND2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏KCND2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了KCND2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。