KV1.1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403806

概要

KCNA1は、ヒトの電位依存性カリウムチャネルサブユニットKV1.1をコードする遺伝子であり、遅延整流性K+電流に寄与して膜興奮性を規定する孔形成コンポーネントです。KV1.1は活動電位の再分極、発火頻度、シナプス伝達に影響し、チャネル活性を神経シグナル伝達およびネットワークの安定性と結び付けています。静止膜電位と、興奮性に依存したCa2+流入の制御を介して、KV1.1は神経伝達物質放出や活動依存的遺伝子発現を制御する経路とも交差します。KCNA1の遺伝学的・機能的な攪乱は、発作性運動失調や発作感受性などの神経学的表現型と関連しており、チャネル病（チャネルパチー）生物学の機構解明研究における重要な標的となっています。

KV1.1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKCNA1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KCNA1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KCNA1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KV1.1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KV1.1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KCNA1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KV1.1の機能に不可欠なKCNA1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KCNA1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KV1.1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKV1.1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KCNA1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KV1.1 HDRプラスミド（h）および KV1.1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKCNA1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKCNA1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。