Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) JunD: sc-400713-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) JunD correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide JunD Double Nickase (h) et le plasmide JunD Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant JUND. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: JunD Antibody (D-9): sc-271938
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) JunD | sc-400713-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) JunD | sc-400713-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JUND code JunD, un facteur de transcription de la famille AP-1 qui dimérise avec les protéines JUN et FOS afin de réguler des programmes d’expression génique dépendants des stimuli. JunD intègre des signaux issus des voies MAPK/ERK et JNK pour contrôler la prolifération, la différenciation, les réponses au stress oxydant et l’apoptose via la modulation transcriptionnelle de gènes du cycle cellulaire et de l’inflammation. Une activité AP-1 altérée impliquant JunD a été associée à la transformation oncogénique, à la fibrose et à des états inflammatoires chroniques, ce qui fait de JUND un nœud pertinent pour disséquer des réseaux transcriptionnels spécifiques du contexte. Dans les cellules humaines, JunD contribue également à des complexes régulateurs associés à la chromatine qui ajustent l’activité des enhancers et la transcription d’adaptation au stress.
JunD Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus JUND dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de JUND. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de JUND. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de JUND.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.