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JMJD2B双切口酶质粒(h) | sc-405385-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JMJD2B双切口酶质粒(h2) | sc-405385-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人源 KDM4B(JMJD2B)编码一种含 Jumonji C(JmjC)结构域的组蛋白赖氨酸去甲基化酶,主要去除具有抑制作用的 H3K9me3/me2 标记,从而重塑染色质可及性与转录程序。通过与细胞周期进程、DNA 损伤应答以及谱系相关基因表达的表观遗传调控相耦联,JMJD2B 影响协调增殖与分化的多条通路。KDM4B 活性和表达的失调与多种疾病相关情境下观察到的异常转录状态有关,包括致癌信号传导以及激素或缺氧应答网络的改变。作为一种染色质调控因子,JMJD2B 常被用于研究组蛋白甲基化动态如何影响基因调控与基因组稳定性。
JMJD2B 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 KDM4B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KDM4B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏KDM4B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了KDM4B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。