Date published: 2026-8-18

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ITI-H4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403358-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • ITI-H4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase ITI-H4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ITI-H4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ITIH4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ITI-H4 Anticorpo (F-9): sc-515353
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    ITI-H4 Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-403358-NIC
    20 µg
    $410.00

    ITI-H4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-403358-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    A cadeia pesada 4 do inibidor inter-alfa-tripsina (ITIH4) é uma glicoproteína secretada, enriquecida no fígado, que sofre processamento proteolítico no plasma e está ligada à estabilização do meio extracelular durante a inflamação. Como membro da família dos inibidores inter-alfa-tripsina, o ITIH4 está associado a respostas de fase aguda e a processos de remodelação regulados por proteases, que se cruzam com a coagulação, a atividade do complemento e a homeostase da matriz extracelular. Alterações na abundância do ITIH4 e nos padrões de fragmentação têm sido relatadas em estados inflamatórios sistêmicos e em múltiplos cânceres, sustentando seu uso como alvo relacionado a biomarcadores para estudos mecanísticos. Investigar a função do ITIH4 ajuda a esclarecer como redes de proteases circulantes e a sinalização inflamatória moldam as respostas à lesão tecidual e mudanças no microambiente associado a tumores.

    ITI-H4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ITIH4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ITIH4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ITIH4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ITIH4 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.