Plasmide Double Nickase (m) IRF-2BP2: sc-435407-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IRF-2BP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IRF-2BP2 Double Nickase (m) et le plasmide IRF-2BP2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Irf2bp2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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Plasmide Double Nickase (m) IRF-2BP2 | sc-435407-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Irf2bp2** code **IRF-2BP2**, un corégulateur transcriptionnel nucléaire qui interagit avec les protéines de la famille IRF afin de moduler des programmes d’expression génique dépendants des stimuli. IRF-2BP2 a été associé à la régulation de la signalisation inflammatoire et de la différenciation des cellules immunitaires, influençant des voies qui façonnent les réponses cytokiniques et la polarisation des macrophages. Par ses effets sur les complexes de répression/activation transcriptionnelle, IRF-2BP2 peut aussi affecter les réponses au stress cellulaire et le dialogue entre métabolisme et inflammation. Des réseaux associés à IRF-2BP2 et leur dérégulation ont été étudiés, chez la souris, dans des contextes de dysfonction immunitaire, de phénotypes cardiométaboliques et de modèles de maladies liées à l’inflammation.
IRF-2BP2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Irf2bp2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Irf2bp2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Irf2bp2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Irf2bp2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.