IRE1α 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400576-NIC

ERN1은 소포체(ER)에 존재하는 막관통 키나아제/엔도리보뉴클레이스인 이노시톨 요구 효소 1 알파(IRE1α)를 암호화하며, 잘못 접힌 단백질을 감지하는 주요 센서이자 미접힘 단백질 반응(UPR)의 핵심 허브로 기능한다. ER 스트레스가 발생하면 IRE1α는 올리고머화되고 RNase 활성이 활성화되어 XBP1 mRNA의 스플라이싱과 IRE1 의존적 조절 분해(RIDD)를 유도하며, 그 결과 단백질 항상성(프로테오스타시스), 분비 능력, 염증, 세포사멸을 조절하는 전사·번역 프로그램이 재편된다. 또한 PERK 및 ATF6 신호와의 상호작용, 그리고 하위의 JNK 및 NF-κB 경로 활성화를 통해 ERN1은 선천면역 신호와 대사 적응에도 영향을 미친다. 조절이 깨진 IRE1α–XBP1 활성은 만성 ER 스트레스를 특징으로 하는 여러 질환, 예를 들어 암세포 생존 프로그램, 신경퇴행, 당뇨병, 염증성 질환 등에 관여하는 것으로 알려져 있어 기전 연구에서 흔히 표적이 된다.

IRE1α 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ERN1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ERN1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ERN1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ERN1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.