IQGAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400597-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IQGAP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IQGAP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase IQGAP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IQGAP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IQGAP1 Anticorpo (C-9): sc-376021
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IQGAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400597-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IQGAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400597-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IQGAP1 codifica a IQGAP1, uma proteína de ancoragem (scaffold) multidomínio que integra sinais de GTPases da família Rho, calmodulina e reguladores do citoesqueleto para coordenar a dinâmica da actina, a polaridade celular e o tráfego de membranas. A IQGAP1 conecta complexos de adesão e o citoesqueleto de actina a vias de sinalização incluindo MAPK/ERK e Wnt/β-catenina, influenciando assim migração, proliferação e citocinese. Por meio de interações com proteínas como CDC42, RAC1, β-catenina, E-caderina e componentes do exocisto, a IQGAP1 ajuda a organizar sinalização espacialmente restrita na borda de avanço e nas junções célula–célula. A desregulação da expressão ou da localização da IQGAP1 tem sido associada a alterações da integridade epitelial, comportamento invasivo e sinalização oncogênica em múltiplos contextos relevantes para o câncer, tornando-a um nó útil para estudos mecanísticos de processos relacionados à metástase.
IQGAP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IQGAP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IQGAP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IQGAP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IQGAP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.