Plasmide Double Nickase (h) Integrin β7/ITGB7: sc-404928-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Integrin β7/ITGB7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Integrin β7/ITGB7 Double Nickase (h) et le plasmide Integrin β7/ITGB7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ITGB7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Integrin β7/ITGB7 Antibody (D-5): sc-515397
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Integrin β7/ITGB7 | sc-404928-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Integrin β7/ITGB7 | sc-404928-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGB7 code l’intégrine β7, une sous-unité de récepteur d’adhérence transmembranaire qui s’associe à α4 ou αE pour former les hétérodimères α4β7 et αEβ7, coordonnant le trafic des leucocytes et leur rétention dans les microenvironnements tissulaires. Ces intégrines se lient à des ligands tels que MAdCAM-1 et l’E‑cadhérine afin de soutenir l’adhérence cellulaire, la migration et le positionnement des cellules immunitaires, en couplant la liaison extracellulaire au remodelage du cytosquelette et à une signalisation bidirectionnelle « inside‑out/outside‑in ». Les voies dépendantes d’ITGB7 contribuent au recrutement des lymphocytes vers les tissus lymphoïdes associés à l’intestin et à la régulation des réponses immunitaires muqueuses. Une signalisation des intégrines dérégulée et une expression altérée d’ITGB7 sont étudiées dans des troubles inflammatoires et en immuno‑oncologie, lorsque la localisation cellulaire, la dynamique d’adhérence et la surveillance immunitaire sont perturbées.
Integrin β7/ITGB7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITGB7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITGB7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITGB7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITGB7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.