Inhibin β-B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421131

概要

Inhbb は、TGF-βスーパーファミリーに属するサブユニットであるインヒビンβBをコードしており、アクチビンBのホモ二量体、または INHBA と組んだアクチビンABのヘテロ二量体を形成して、SMAD2/3 依存的な転写を調節します。アクチビンシグナルは、生殖腺の発生、卵胞形成、セルトリ細胞および顆粒膜細胞の機能を制御するとともに、より広範には細胞増殖・分化や細胞外マトリックスのリモデリングの制御にも関与します。マウスでは、Inhbb 活性の変化が生殖関連の表現型や内分泌調節異常と関連づけられており、その経路は、状況依存的なサイトカイン発現制御や組織リモデリングを介して炎症・線維化プログラムとも交差します。これらの特性により、Inhbb は発生生物学および疾患関連の細胞状態における TGF-β／アクチビン経路のネットワーク構造を研究する上で有用な結節点となります。

Inhibin β-B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるInhbb遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Inhbb内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Inhbbのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Inhibin β-Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Inhibin β-Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Inhbb欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Inhibin β-Bの機能に不可欠なInhbbエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Inhbbゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Inhibin β-B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびInhibin β-B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Inhbb遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Inhibin β-B HDRプラスミド（m）および Inhibin β-B HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはInhbbホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のInhbb標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。