Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IMP-1/IGF2BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431212
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IMP-1/IGF2BP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IMP-1/IGF2BP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IMP-1/IGF2BP1 Anticorpo (D-9): sc-166344
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IMP-1/IGF2BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-431212 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Igf2bp1 codifica a proteína ligante de RNA IMP-1/IGF2BP1, um regulador pós-transcricional que reconhece mRNAs-alvo por meio de domínios KH e modula a sua localização, estabilidade e tradução. Em células de camundongo, a IGF2BP1 ajuda a coordenar programas associados a crescimento e diferenciação ao moldar o destino dos mRNAs em grânulos ribonucleoproteicos e em vias de transporte dependentes do citoesqueleto. Sua rede regulatória se cruza com eixos de sinalização proliferativos e do desenvolvimento e é frequentemente estudada pelos efeitos sobre transições de estado celular, localização de RNA associada à migração e controle translacional. Programas de RNA associados à IGF2BP1 desregulados têm sido implicados em fenótipos oncogênicos e em homeostase tecidual alterada, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de regulação da expressão gênica em modelos pertinentes a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IMP-1/IGF2BP1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Igf2bp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Igf2bp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Igf2bp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IMP-1/IGF2BP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Igf2bp1 para a investigação da sinalização de IMP-1/IGF2BP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Igf2bp1 críticos para a função IMP-1/IGF2BP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Igf2bp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IMP-1/IGF2BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IMP-1/IGF2BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Igf2bp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IMP-1/IGF2BP1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IMP-1/IGF2BP1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Igf2bp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Igf2bp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.