IL-22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403228

Visão geral

O gene humano **IL22** codifica a interleucina-22 (IL-22), uma citocina produzida predominantemente por células Th17/Th22 e por células linfoides inatas, que sinaliza por meio do complexo receptor IL-22R1/IL-10R2 nos compartimentos epitelial e estromal. A IL-22 ativa a sinalização de STAT3 dependente de JAK1/TYK2 e interage com as vias MAPK e PI3K para regular a integridade da barreira, a expressão de peptídeos antimicrobianos, a produção de muco e programas de reparo tecidual em superfícies mucosas. A atividade desregulada de IL-22 tem sido implicada em circuitos inflamatórios que conectam células imunes a epitélios em condições que afetam pele, pulmão e trato gastrointestinal, e pode modular a inflamação associada a tumores e a proliferação epitelial, dependendo do contexto. Essas propriedades tornam o **IL22** um alvo útil para investigar a comunicação imune–epitelial, a biologia de barreiras e respostas transcricionais conduzidas por citocinas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-22 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IL22 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IL22, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IL22 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-22.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IL22 para a investigação da sinalização de IL-22, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IL22 críticos para a função IL-22
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IL22 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo IL-22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IL-22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IL22. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-22 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IL-22 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IL22 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IL22 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.