IL-1RII CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421099

概要

Il1r2は、マウスのインターロイキン1受容体タイプII（IL-1RII）をコードしている。IL-1RIIはIL-1受容体ファミリーの中でも非典型的なメンバーで、主にIL-1αおよびIL-1βに対するデコイ（おとり）受容体として機能する。IL-1リガンドに結合しても有効なシグナル伝達を起こさないことで、IL-1RIIはIL-1R1に利用可能なリガンド量を制限し、NF-κBやMAPK依存性の転写プログラムを介して進行する下流の炎症カスケードを抑制する。IL-1RIIの活性は、骨髄系細胞および間質系コンパートメントにおける自然免疫の活性化、白血球の動員、サイトカインネットワークの増幅を調整するのに寄与する。IL-1RIIの発現量やシェディング（細胞表面からの遊離）の変化は、自己免疫性炎症、感染生物学、組織損傷モデルなどに関連する炎症応答の破綻と関連づけられている。

IL-1RII CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl1r2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il1r2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il1r2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-1RIIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-1RIIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il1r2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-1RIIの機能に不可欠なIl1r2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il1r2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-1RII CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-1RII CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il1r2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-1RII HDRプラスミド（m）および IL-1RII HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl1r2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl1r2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。