IL-13Rα2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-402525

Panoramica

IL13RA2 codifica per la subunità alfa 2 del recettore dell’interleuchina-13 (IL-13Rα2), un recettore ad alta affinità per IL-13 che modula la segnalazione delle citochine di tipo 2 sulla superficie cellulare. A differenza del complesso di segnalazione IL-13Rα1/IL-4Rα, che attiva programmi trascrizionali JAK/STAT6, IL-13Rα2 è spesso descritto come un recettore “decoy” (esca) o come una componente di segnalazione dipendente dal contesto, in grado di influenzare la disponibilità di IL-13, il trafficking del recettore e le risposte a valle legate a infiammazione e rimodellamento tissutale. IL-13Rα2 è stato associato a vie che regolano l’organizzazione della matrice extracellulare, la migrazione cellulare e il crosstalk con il microambiente immunitario. Un’alterata espressione di IL13RA2 è stata riportata in condizioni infiammatorie e in molteplici tipi di tumore, rendendolo un bersaglio utile per studiare la responsività alle citochine e fenotipi cellulari rilevanti per la malattia in sistemi modello umani.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-13Rα2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene IL13RA2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del IL13RA2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto IL13RA2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-13Rα2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di IL13RA2 per lo studio della segnalazione di IL-13Rα2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni IL13RA2 critici per la funzione di IL-13Rα2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di IL13RA2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IL-13Rα2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal IL-13Rα2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus IL13RA2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IL-13Rα2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR IL-13Rα2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia IL13RA2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio IL13RA2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.