Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Western blot analysis of human recombinant IL-1α. Antibodies tested include IL-1α (H-159): sc-7929 (A) and IL-1α (B-7): sc-9983 (B).
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IL-1α双切口酶质粒(h): sc-418057-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- IL-1α 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- IL-1α双切酶质粒（h）和IL-1α双切酶质粒（h2）编码针对IL1A的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：IL-1α: sc-12741，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
IL-1α双切口酶质粒(h) | sc-418057-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-1α双切口酶质粒(h2) | sc-418057-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 IL1A 基因编码白细胞介素-1α（IL-1α），这是一种由上皮细胞和髓系细胞谱系产生的促炎性细胞因子，既可作为膜相关配体发挥作用，也可在细胞受损时作为“警报素”（alarmin）被释放。IL-1α 主要通过 IL-1R1 受体传递信号，启动依赖 MyD88 的级联反应，从而激活 NF-κB 和 MAPK 通路，驱动趋化因子、黏附分子及继发性细胞因子的转录表达。该信号轴参与白细胞募集、发热与急性期反应，并在炎症过程中协调基质与内皮细胞区室的重塑。IL-1α 活性失衡与慢性炎症性疾病以及肿瘤相关炎症有关，因此 IL1A 是解析细胞因子网络和先天免疫信号传导的重要节点。
IL-1α 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 IL1A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IL1A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏IL1A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了IL1A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。