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IGFBP2慢病毒激活颗粒(m) | sc-421063-LAC | 200 µl | $455.00 |
Igfbp2 编码胰岛素样生长因子结合蛋白 2(IGFBP2)。IGFBP2 是一种分泌型调控因子,可调节 IGF 的生物可利用性,从而影响 IGF1/IGF2 信号的强度、与受体的结合以及下游 PI3K–AKT 和 MAPK 通路的活性。通过在细胞外环境中缓冲并定位 IGF 配体,IGFBP2 会影响细胞增殖、生存、迁移和与基质的相互作用,并可塑造组织生长与代谢稳态。在小鼠模型中,Igfbp2 表达改变与脂肪量和胰岛素敏感性的变化有关,同时还与炎症和组织重塑的情境依赖性效应相关。这些特性使 Igfbp2 成为研究生长因子信号动态、肿瘤微环境生物学以及发育与疾病相关状态下内分泌—旁分泌串扰的有用靶点。
IGFBP2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Igfbp2 表达。
IGFBP2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Igfbp2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性IGFBP2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Igfbp2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。