Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IGFBP2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-401076-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IGFBP2 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IGFBP2ダブルニカースプラスミド（h）およびIGFBP2ダブルニカースプラスミド（h2）は、IGFBP2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: IGFBP2 抗体 (C-10): sc-25285
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IGFBP2 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401076-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP2 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401076-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGFBP2（インスリン様成長因子結合タンパク質2）は分泌性のIGFシグナル制御因子であり、IGF-I/IGF-IIの生物学的利用能や受容体への結合を調節することで、PI3K–AKTおよびMAPK経路の活性に影響を与えます。リガンドの捕捉（隔離）にとどまらず、IGFBP2は細胞外マトリックス成分やインテグリンとも相互作用し、細胞接着、遊走、生存に関わるプログラムに作用します。その発現は、代謝制御、組織リモデリング、炎症、がん化シグナルなどの状況で変動することが多く、成長因子駆動性の表現型を解析するうえで重要な標的となります。IGFBP2を研究することは、多様なヒト細胞モデルにおける増殖シグナル、細胞運動性、ならびに微小環境との相互作用に関する機構解析を支えます。
IGFBP2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における IGFBP2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、IGFBP2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、IGFBP2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、IGFBP2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。