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IGF2BP3慢病毒激活颗粒(h) | sc-402603-LAC | 200 µl | $455.00 |
IGF2BP3(insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 3,胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3)是一种肿瘤—胎儿型RNA结合蛋白,通过结合并稳定靶mRNA、调控其定位与翻译,从而在转录后层面调节基因表达。它参与RNA颗粒的动态过程,并影响调控细胞周期进程、迁移和应激反应的多条通路;其中一部分作用是通过控制与PI3K–AKT和MAPK信号输出相关的转录本实现的。IGF2BP3在大多数成人组织中表达较低,但在多种肿瘤类型中常出现上调,并与侵袭性表型及分化程序改变相关。因此,IGF2BP3被广泛研究,作为连接mRNA命运决定与细胞增殖、侵袭状态的关键机制节点。
IGF2BP3 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 IGF2BP3 表达。
IGF2BP3 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在IGF2BP3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性IGF2BP3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 IGF2BP3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。