IFN-ω CRISPR Activationプラスミド (h): sc-409162-ACT

IFNW1はインターフェロン・オメガ（IFN-ω）をコードしており、自然免疫による抗ウイルス防御および免疫監視に寄与するI型インターフェロンの一種です。IFN-ωはIFNAR受容体複合体を介してシグナルを伝達し、JAK–STAT経路を活性化するとともに、ウイルス増殖の制限、抗原提示、炎症プログラムの調節に関与するインターフェロン刺激遺伝子（ISG）を誘導します。その活性は、感染や細胞ストレスに対する転写応答を協調的に制御するRIG-I/MDA5やcGAS–STINGなどの核酸感知経路とも交差します。IFN-ωの異常発現を含むI型インターフェロンシグナルの破綻は、慢性炎症、自己免疫、腫瘍–免疫相互作用の研究において重要であり、インターフェロン駆動性の遺伝子ネットワークが細胞表現型を形成します。

IFN-omega CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性IFNW1の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

IFN-omega CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における IFNW1 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はIFNW1転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性IFN-omegaの発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のIFNW1遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるIFN-omega依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびIFNW1発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるIFN-omega経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。