IFN-α/βRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403854-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-α/βRβO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IFN-α/βRβ (h) e o Plasmídeo Double Nickase IFN-α/βRβ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IFNAR2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IFN-α/βRβ Anticorpo (G-4): sc-376273
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-α/βRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403854-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFN-α/βRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403854-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFNAR2 codifica a subunidade beta do receptor de interferon alfa/beta, um componente essencial do complexo receptor de interferon do tipo I que coopera com o IFNAR1 para reconhecer IFN-α/β e iniciar a sinalização antiviral e imunomoduladora. A ligação do ligante ativa JAK1 e TYK2, levando à fosforilação de STAT1/STAT2 e à formação do complexo ISGF3, que induz a expressão de genes estimulados por interferon, com crosstalk com as vias MAPK e PI3K. Por meio dessas cascatas, o IFNAR2 ajuda a regular o reconhecimento imune inato, a apresentação de antígenos, o controle do ciclo celular e a apoptose em diversos tipos celulares. A sinalização desregulada de IFNAR2 tem sido implicada em respostas antivirais alteradas, inflamação crônica e patologia mediada pelo sistema imune, o que a torna um alvo frequente em estudos de biologia do interferon e de interações hospedeiro–patógeno.
IFN-α/βRβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IFNAR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IFNAR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IFNAR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IFNAR2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.