Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IFN-α/βRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421048
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IFN-α/βRβ CRISPR/Cas9 ノックアウト（KO）プラスミド（m）は、GeCKO v2ライブラリ由来の配列を用いて最大のノックアウト効率を実現するよう設計された、Cas9ヌクレアーゼおよび標的特異的な20塩基対のガイドRNA（gRNA）をそれぞれコードするプラスミドのプールです
- gRNA配列は、Cas9を誘導してIFN-α/βRβゲノム座において部位特異的な二本鎖切断（DSBs）を引き起こし、非相同末端結合（NHEJ）を介して遺伝子ノックアウトをもたらします
- ピューロマイシン耐性遺伝子とRFP遺伝子はLoxP部位で挟まれているため、安定したノックアウト細胞株を樹立した後、Creリコンビナーゼ（Creベクター：sc-418923）を用いて選択マーカーを除去することができる。
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: IFN-α/βRβ 抗体 (F-7): sc-137209
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IFN-α/βRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m) | sc-421048 | 20 µg | $397.00 |
概要
Ifnar2 は、マウスのインターフェロンα/β受容体サブユニットである IFN-α/βRβ（IFNAR2）をコードしており、細胞外での IFN-α/β の結合を細胞内の JAK–STAT シグナル伝達へと結び付ける、I型インターフェロン受容体複合体の中核構成要素である。受容体が活性化されると、IFNAR2 は IFNAR1 と協調して TYK2 と JAK1 を活性化し、STAT1/STAT2 のリン酸化と ISGF3 の形成を促進して、抗ウイルス防御、抗原提示、自然免疫細胞のプログラミングを制御するインターフェロン刺激遺伝子の発現を誘導する。この経路は炎症応答の基準値（セットポイント）を形作り、NF-κB や MAPK シグナルとのクロストークを通じてサイトカインネットワークと免疫恒常性に影響を及ぼす。IFNAR2 依存的シグナルの異常は、免疫介在性の病態や感染・炎症に対する感受性の変化に関与するとされており、免疫学および宿主—病原体生物学における機構解明研究の重要な標的となっている。
IFN-α/βRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIfnar2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ifnar2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。
このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ifnar2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFN-α/βRβタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。
このCRISPRノックアウトシステムにより、IFN-α/βRβシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ifnar2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。
主な特徴
- IFN-α/βRβの機能に不可欠なIfnar2エクソンを標的とするsgRNA
導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
ノックアウト効率を向上させるための、Ifnar2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
トランスフェクションによる導入に対応
設計バリエーション
CRISPRs +/- HDR
- IFN-α/βRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIFN-α/βRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ifnar2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
IFN-α/βRβ HDRプラスミド（m）および IFN-α/βRβ HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIfnar2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIfnar2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。