IFN-α4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421041

概要

Ifna4 はインターフェロンα4（IFN-α4）をコードしており、IFN-α4 はウイルス由来核酸などの自然免疫トリガーに応答して産生される I 型インターフェロンです。IFN-α4 は IFNAR 受容体複合体に結合して、JAK1/TYK2 依存的に STAT1/STAT2 のリン酸化と ISGF3 転写複合体の形成を活性化し、病原体の複製を抑制し抗原提示を調節するインターフェロン刺激遺伝子の発現を誘導します。このシグナル伝達は NF-κB および IRF 経路とのクロストークを形成し、炎症性遺伝子プログラム、骨髄系細胞の活性化、ならびに獲得免疫のプライミングに影響します。I 型インターフェロン活性の制御異常は、慢性炎症や自己免疫の研究に加え、インターフェロンの「トーン」が疾患感受性や組織病理に影響する宿主—病原体相互作用モデルにおいても重要です。

IFN-α4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIfna4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ifna4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ifna4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFN-α4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFN-α4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ifna4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFN-α4の機能に不可欠なIfna4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ifna4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFN-α4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIFN-α4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ifna4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFN-α4 HDRプラスミド（m）および IFN-α4 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIfna4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIfna4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。