Id1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400341-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Id1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Id1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Id1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ID1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Id1 Anticorpo (B-8): sc-133104
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Id1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400341-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Id1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400341-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **ID1** codifica a proteína **Id1**, uma proteína do tipo hélice–alça–hélice (HLH) que não possui a região básica de ligação ao DNA e atua como um regulador dominante-negativo de fatores de transcrição bHLH. Ao sequestrar proteínas E, a Id1 modula programas transcricionais que controlam a progressão do ciclo celular, o compromisso de linhagem e a diferenciação, sendo frequentemente associada a estados semelhantes aos de células-tronco e à plasticidade celular. A expressão de **ID1** é regulada a jusante de sinais mitogênicos e de desenvolvimento, incluindo a sinalização associada a BMP/TGF-β, e integra-se a vias que influenciam proliferação e migração. A desregulação da atividade de **ID1** tem sido associada a redes transcricionais oncogênicas e a alterações de diferenciação em diversos contextos de doença, sustentando seu uso como alvo em estudos mecanísticos de controle do crescimento e decisões de destino celular.
Id1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ID1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ID1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ID1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ID1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.