HSPA14 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407280-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSPA14O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSPA14 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSPA14 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSPA14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSPA14 Anticorpo (G-9): sc-398208
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSPA14 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407280-NIC | 20 µg | $410.00 |
O HSPA14 codifica um membro da família HSP70 que atua como uma chaperona molecular dependente de ATP, auxiliando o dobramento de polipeptídeos nascentes, o controle de qualidade proteica e a manutenção da proteostase em condições basais e de estresse. A atividade do HSPA14 se integra às respostas ao choque térmico e às redes de co-chaperonas para regular o dobramento associado à tradução e limitar o acúmulo de proteínas mal dobradas. Por meio dessas funções, influencia a resiliência celular ao estresse, a sinalização de estresse proteotóxico e a recuperação de agressões ambientais ou metabólicas que perturbam a homeostase proteica. A desregulação da capacidade de chaperonas, incluindo componentes da família HSP70 como o HSPA14, é frequentemente estudada em contextos de neurodegeneração, adaptação de células tumorais ao estresse e distúrbios caracterizados por manutenção deficiente do proteoma.
HSPA14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSPA14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSPA14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSPA14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSPA14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.