Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSP90B1/HSP90 beta 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-420980-NIC
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- HSP90B1/HSP90 beta Double Nickase Plasmid (m) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- HSP90B1/HSP90 beta 더블 니케이스 플라스미드 (m) 및 HSP90B1/HSP90 beta 더블 니케이스 플라스미드 (m2)는 Hsp90ab1을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
HSP90B1/HSP90 beta 더블 틈내기효소 플라스미드 (m) | sc-420980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP90B1/HSP90 beta 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2) | sc-420980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Hsp90ab1은 세포질 HSP90 베타 분자 샤페론을 암호화하며, 단백질 키나아제, 스테로이드 호르몬 수용체, 신호 전달 어댑터 등 폭넓은 클라이언트 단백질들이 올바르게 접히고 안정화되며 구조적으로 성숙하도록 촉진함으로써 단백질 항상성(proteostasis)을 유지하는 데 기여한다. 코샤페론과 함께 ATP 의존적 샤페론 사이클을 수행하면서 스트레스 반응, 단백질 품질 관리, 다단백질 복합체의 조립에 관여하고, MAPK/ERK, PI3K–AKT, 선천면역 신호전달 등의 경로와도 연결된다. 마우스 HSP90 베타의 활성은 자가포식과 프로테아좀 분해 같은 세포 항상성 과정과도 연관되어 있으며, 이는 열충격과 산화 스트레스에 대한 반응을 형성한다. 샤페론 기능의 이상 조절은 종양성 신호전달 의존성, 신경퇴행성 질환에서의 단백질 오접힘, 염증성 질환 기전의 맥락에서 자주 연구되므로, Hsp90ab1은 경로 분석을 위한 유용한 결절점으로 여겨진다.
HSP90B1/HSP90 beta 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Hsp90ab1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Hsp90ab1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Hsp90ab1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Hsp90ab1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.