Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSP90B1/HSP90 beta 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400214-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- HSP90B1/HSP90 beta Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- HSP90B1/HSP90 beta 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 HSP90B1/HSP90 beta 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 HSP90AB1을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 HSP90B1/HSP90 beta Antibody (AT94B9): sc-517405
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
HSP90B1/HSP90 beta 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-400214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP90B1/HSP90 beta 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-400214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSP90AB1는 세포질 HSP90 베타(HSP90B1/HSP90 beta)를 암호화하며, 이는 ATP 의존적 분자 샤페론으로서 신호전달, 세포주기 조절, 스트레스 반응에 관여하는 폭넓은 클라이언트 단백질을 안정화하고 성숙시키는 역할을 합니다. 단백질 항상성(proteostasis) 네트워크의 핵심 구성요소로서 HSP90 베타는 공동 샤페론 및 유비퀴틴–프로테아좀 시스템과 협력해 단백질 접힘, 품질 관리, 분해를 조절하며, MAPK/ERK, PI3K–AKT, DNA 손상 반응 등의 경로에 영향을 줍니다. HSP90 베타 기능에 교란이 생기면 단백질체 안정성과 단백질 독성 스트레스 처리 방식이 재구성될 수 있으며, 종양성 신호전달 의존성 연구, 신경퇴행과 연관된 단백질 오접힘, 염증성 또는 대사성 스트레스 표현형 연구와 관련성이 있습니다. 많은 키나아제와 전사 조절 인자가 HSP90 활성에 의존하기 때문에, HSP90AB1은 샤페론에 의해 완충되는 신호전달의 견고성과 스트레스 하에서의 세포 적응을 분석하는 데 자주 활용됩니다.
HSP90B1/HSP90 beta 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 HSP90AB1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 HSP90AB1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 HSP90AB1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, HSP90AB1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.