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hnRNP L双切口酶质粒(h) | sc-402196-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
hnRNP L双切口酶质粒(h2) | sc-402196-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 HNRNPL 基因编码 hnRNP L,这是一种 RNA 结合蛋白,能够识别富含 CA 的序列元件,从而协调前体 mRNA(pre-mRNA)的可变剪接、转录本稳定性以及核-胞质 RNA 加工。hnRNP L 在剪接体和核糖核蛋白复合物中发挥作用,调控外显子是否被纳入,并促进转录与 RNA 成熟过程的耦联,进而影响细胞周期控制、应激反应相关基因表达等程序。通过调控不同同种型(isoform)的特异性表达,hnRNP L 可在转录后水平调节包括 MAPK 和凋亡相关通路在内的信号输出。hnRNP L 活性失调及剪接改变与增殖表型以及多种人类疾病中观察到的异常 RNA 加工模式有关,使其成为研究依赖剪接的基因调控机制的重要靶点。
hnRNP L 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HNRNPL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HNRNPL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HNRNPL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HNRNPL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。