hnRNP A0 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-406924-LAC

HNRNPA0 codifica a hnRNP A0, uma proteína ligante de RNA que se associa a complexos mRNP para regular a expressão gênica pós-transcricional, incluindo a estabilidade do mRNA, sua degradação/recambio e a tradução de transcritos selecionados. Por meio dessas funções, contribui para respostas celulares ao estresse e para a remodelação dinâmica de programas de expressão gênica que afetam o controle do ciclo celular e a sinalização inflamatória. A hnRNP A0 tem sido estudada no contexto de redes de sinalização acionadas por quinases e de vias de metabolismo de RNA que determinam o destino dos transcritos sob condições de estresse. A desregulação de proteínas da família hnRNP e de mecanismos associados de processamento de RNA é frequentemente ligada a fenótipos alterados de proliferação e adaptação ao estresse, relevantes para a biologia do câncer e para outros distúrbios envolvendo expressão gênica aberrante.

As Partículas de Ativação Lentivirais hnRNP A0 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de HNRNPA0 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais hnRNP A0 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição HNRNPA0, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de hnRNP A0. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo HNRNPA0 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.