HIVEP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421334

概要

Hivep3 は、κB様DNA配列に結合して刺激応答性の遺伝子発現プログラムを調節する、大型のジンクフィンガー型転写因子 HIVEP3 をコードします。HIVEP3 は、免疫および炎症性シグナル伝達ネットワークの制御に関与しており、サイトカイン産生、リンパ球活性化、細胞ストレス応答を統括する NF-κB をはじめとする関連経路の下流に位置する転写出力と結び付けられています。マウス系では、HIVEP3 活性の変化が免疫恒常性の破綻や炎症表現型と関連することが報告されており、自己免疫や組織炎症の機序研究における重要性を支持しています。さらに、配列特異的なDNA結合と広範な転写制御を統合する特性から、Hivep3 は遺伝子制御回路や細胞状態遷移を研究するためのノードとしても用いられます。

HIVEP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるHivep3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Hivep3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Hivep3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HIVEP3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HIVEP3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Hivep3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HIVEP3の機能に不可欠なHivep3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Hivep3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HIVEP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびHIVEP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Hivep3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HIVEP3 HDRプラスミド（m）および HIVEP3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHivep3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHivep3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。