Histone cluster 1 H1D Double Nickase Plasmid (h): sc-408739-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Histone cluster 1 H1D Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Histone cluster 1 H1D Double-Nickase-Plasmid (h) und Histone cluster 1 H1D Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf HIST1H1D abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Histone cluster 1 H1D Double Nickase Plasmid (h) | sc-408739-NIC | 20 µg | $410.00 |
HIST1H1D kodiert Histon-Cluster 1 H1D, ein Linker-Histon, das an der Ein- und Austrittsstelle nukleosomaler DNA bindet, um eine höhergeordnete Chromatinkondensation zu fördern und die Zugänglichkeit des Genoms zu regulieren. Durch die Modulation des Nukleosomenabstands und der Organisation der Chromatinfaser beeinflusst H1D Transkriptionsprogramme, das Timing der DNA-Replikation sowie die Effizienz der Signalübertragung bei DNA-Schäden und deren Reparatur. Eine veränderte Menge oder Verteilung von Histon H1 wird mit epigenetischer Fehlregulation, genomischer Instabilität und aberranten Differenzierungszuständen in unterschiedlichen Krebs- und entwicklungsbiologischen Modellsystemen in Verbindung gebracht. Als Teil des Histon-Clusters ist HIST1H1D zudem relevant für Studien zur replikationsgekoppelten Chromatinassemblierung und zur zellzyklusabhängigen Chromatinremodellierung.
Histone cluster 1 H1D Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des HIST1H1D-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von HIST1H1D abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die HIST1H1D-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit HIST1H1D-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.