HiNF-P CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-416760

概要

HINFP は、転写因子 HiNF-P をコードしている。HiNF-P は細胞周期によって制御されるヒストン H4 遺伝子発現の調節因子であり、DNA 複製とクロマチン組み立ての協調に寄与する。HiNF-P は S 期遺伝子プロモーターで機能し、増殖中のゲノム安定性を維持する転写およびエピジェネティック制御プログラムと連携する。HINFP 依存的なヒストン供給が破綻すると、ヌクレオソームの沈着、複製タイミング、DNA 損傷応答が乱れ得るため、この経路は、がん生物学やその他の増殖関連疾患で研究される制御不全の増殖表現型と結び付けられている。ヒトの核内因子として、HiNF-P は細胞周期制御、複製ストレス、クロマチン構造のモデル系で一般的に解析されている。

HiNF-P CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHINFP遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HINFP内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HINFPのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HiNF-Pタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HiNF-Pシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HINFP欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HiNF-Pの機能に不可欠なHINFPエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HINFPゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HiNF-P CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびHiNF-P CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HINFP遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HiNF-P HDRプラスミド（h）および HiNF-P HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHINFPホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHINFP標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。