Hbb-y Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420805
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Hbb-y O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Hbb-y, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hbb-y Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420805 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Hbb-y codifica uma subunidade beta‑like da hemoglobina de camundongo que contribui para a montagem do tetrâmero de hemoglobina e para o transporte de oxigênio nos eritrócitos. Como parte do programa de diferenciação eritroide, a expressão de Hbb-y é coordenada com a biossíntese do heme, o equilíbrio entre cadeias de globina e as vias de maturação das hemácias, reguladas por redes transcricionais eritroides. Alterações em genes do tipo beta‑globina podem comprometer a estabilidade da hemoglobina e a fisiologia das hemácias, oferecendo modelos para estudar mecanismos relevantes para anemia, hemoglobinopatias e eritropoiese sob estresse. Em camundongos, Hbb-y também é útil para dissecar a regulação do desenvolvimento e específica de linhagem dentro do cluster gênico da beta‑globina.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Hbb-y (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hbb-y em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hbb-y, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hbb-y na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Hbb-y.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hbb-y para a investigação da sinalização de Hbb-y, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hbb-y críticos para a função Hbb-y
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hbb-y para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Hbb-y Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Hbb-y Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hbb-y. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Hbb-y Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Hbb-y (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hbb-y para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hbb-y definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.