Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HB9 Plasmide Double Nickase (h): sc-402097-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HB9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HB9 Double Nickase Plasmid (h) e il HB9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MNX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HB9 Antibody (F-5): sc-515769
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HB9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HB9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MNX1 codifica il fattore di trascrizione homeobox HB9, un regolatore di legame al DNA specifico per sequenza essenziale per la patterning ventrale del midollo spinale e per la differenziazione dei motoneuroni durante lo sviluppo. HB9 si integra nei programmi trascrizionali a valle della segnalazione dei morfogeni e coopera con altri fattori a dominio homeobox per stabilire l’identità dei sottotipi neuronali, le proprietà di guida assonale e la maturazione dei circuiti motori. In contesti ematopoietici, l’espressione deregolata di MNX1 e le riarrangiamenti cromosomici che coinvolgono questo locus sono stati associati a leucemie acute, evidenziandone la rilevanza nella specificazione di linea aberrante e nel controllo trascrizionale. In quanto regolatore dello sviluppo, MNX1 è spesso studiato in modelli di neurogenesi, determinazione del destino cellulare e deregolazione trascrizionale associata a malattia.
HB9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MNX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MNX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MNX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MNX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.