Plasmide Double Nickase (h) Gα z: sc-402241-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Gα z correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Gα z Double Nickase (h) et le plasmide Gα z Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GNAZ. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Gα z | sc-402241-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Gα z | sc-402241-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNAZ code la sous-unité humaine Gαz, membre de la famille inhibitrice Gi/o des protéines G hétérotrimériques, qui couple les GPCR activés à leurs effecteurs en aval. Gαz module la signalisation de l’AMPc via la régulation de l’adénylate cyclase et influence des voies associées à MAPK et PI3K, qui déterminent l’excitabilité cellulaire, la sécrétion et des réponses liées à la croissance. En tant que protéine G insensible à la toxine pertussique et dotée de propriétés biochimiques distinctes, elle est étudiée dans des contextes de signalisation neuronale et endocrinienne où la dynamique des seconds messagers dépendante des récepteurs est étroitement contrôlée. Une signalisation GPCR–protéine G dérégulée impliquant GNAZ a été examinée dans des modèles pertinents pour la maladie d’une prolifération aberrante et d’une neurotransmission altérée, ce qui étaye son intérêt en tant que nœud mécanistique pour la recherche sur les réseaux de signalisation.
Gα z Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GNAZ dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GNAZ. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GNAZ. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GNAZ.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.