Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Gα t1 Antibody (F-7): sc-518145. Western blot analysis of Gα t1 expression in non-transfected 293T: sc-117752 (A) and mouse Gα t1 transfected 293T: sc-120374 (B) whole cell lysates and mouse eye (C) and human eye (D) tissue extracts. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
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Gα t1双切口酶质粒(h): sc-401559-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Gα t1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Gα t1双切酶质粒（h）和Gα t1双切酶质粒（h2）编码针对GNAT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Gα t1: sc-518139，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Gα t1双切口酶质粒(h) | sc-401559-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gα t1双切口酶质粒(h2) | sc-401559-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNAT1 编码杆细胞特异的转导蛋白 α 亚基 Gαt1。Gαt1 是一种异源三聚体 G 蛋白，在光传导过程中将被激活的视紫红质与 cGMP 磷酸二酯酶（PDE6）连接起来。受光刺激后，Gαt1 将 GDP 置换为 GTP，并传递信号以降低 cGMP 水平，调节环核苷酸门控通道的活性，从而塑造光感受器的膜电位及其突触输出。该由 GPCR 介导的级联反应受到 GTP 水解以及与 βγ 亚基重新结合的严格调控，从而在视网膜杆细胞中整合信号放大与恢复动力学。GNAT1 依赖性信号的失调与遗传性视网膜功能障碍相关，因此 GNAT1 也被用作研究视觉信号传递机制与光感受器生理学的靶点。
Gα t1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GNAT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GNAT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GNAT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GNAT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。