Gα 14 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404556-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gα 14O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Gα 14 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Gα 14 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GNA14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gα 14 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404556-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gα 14 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404556-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNA14 codifica a subunidade alfa da proteína G heterotrimérica Gα14, membro da família Gq/11 que acopla GPCRs ativados à fosfolipase C-β. Por meio da geração de IP3 e diacilglicerol dependente de PLCβ, a Gα14 promove a mobilização intracelular de Ca2+ e a sinalização via proteína quinase C, conectando estímulos de receptores à ativação de MAPK/ERK e a programas transcricionais que moldam a proliferação, a diferenciação e respostas secretórias. A atividade de GNA14 é particularmente relevante em contextos em que a sinalização por GPCR regula o tônus vascular, a função endócrina e a ativação de células imunes. A desregulação da sinalização da classe Gq, incluindo alterações envolvendo GNA14, tem sido implicada em sinalização de crescimento aberrante e na biologia tumoral, sustentando seu uso como um nó para investigar vias acionadas por GPCR.
Gα 14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GNA14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GNA14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GNA14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GNA14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.