Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) GSK3 beta: sc-425249-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) GSK3 beta correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GSK3 beta Double Nickase (m) et le plasmide GSK3 beta Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Gsk3b. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GSK3 beta Antibody (E-11): sc-377213
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) GSK3 beta | sc-425249-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Gsk3b** code la glycogène synthase kinase 3 bêta (GSK3β), une kinase sérine/thréonine qui intègre des signaux contrôlant le métabolisme du glycogène, la progression du cycle cellulaire et l’apoptose. GSK3β constitue un nœud central de la signalisation Wnt/β-caténine grâce à une régulation, dépendante de la phosphorylation, de la stabilité de la β-caténine ; elle interagit également avec les voies PI3K–AKT, la signalisation de l’insuline et des voies inflammatoires telles que NF-κB. En modulant des facteurs de transcription et des régulateurs du cytosquelette, GSK3β influence la polarité neuronale, la plasticité synaptique et les programmes de différenciation. Une activité dérégulée de GSK3β a été associée à des altérations de la mise en place des plans de développement, à des dysfonctionnements métaboliques, à des phénotypes neurodégénératifs et à des contextes de signalisation oncogénique, ce qui en fait une cible fréquente des études mécanistiques des voies de signalisation.
GSK3 beta Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Gsk3b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Gsk3b. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Gsk3b. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Gsk3b.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.