GRPR CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401637

概要

GRPR（ガストリン放出ペプチド受容体）は、7回膜貫通型のGタンパク質共役受容体（GPCR）であり、ガストリン放出ペプチド（GRP）／ボンベシン様リガンドに結合して、細胞内カルシウム動員およびPLC、PKC、MAPKカスケードを介した下流シグナル伝達を制御します。GRPRの活性は、細胞増殖、分泌、神経調節過程に影響し、上皮および神経の生理機能を状況依存的に調節することと関連しています。GRPRの発現やシグナル伝達の変化は、がん化に関わるシグナルネットワーク、ならびに神経内分泌系および消化管系経路の破綻と、疾患関連モデルにおいて関連づけられています。明確なリガンド応答性をもつ膜受容体として、GRPRはGPCR駆動型シグナル伝達、受容体トラフィッキング、転写応答を解析するための扱いやすい標的点（ノード）となります。

GRPR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGRPR遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GRPR内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GRPRのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GRPRタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GRPRシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GRPR欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GRPRの機能に不可欠なGRPRエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GRPRゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GRPR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGRPR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GRPR遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GRPR HDRプラスミド（h）および GRPR HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGRPRホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGRPR標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。