GPR41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402190
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR41 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GPR41, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402190 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FFAR3 codifica o receptor acoplado à proteína G GPR41, um sensor de superfície celular para ácidos graxos de cadeia curta, como acetato, propionato e butirato, produzidos pela fermentação microbiana. Após a ligação do ligante, o GPR41 acopla-se principalmente à sinalização via Gi/o para reduzir o cAMP e modular vias a jusante que influenciam o metabolismo celular, programas de secreção e o tônus inflamatório de maneira dependente do contexto. A atividade de FFAR3 tem sido associada à comunicação hospedeiro–microbioma, à regulação do balanço energético e a redes de sinalização neuroendócrinas e imunes. Alterações na sinalização FFAR3/GPR41 são estudadas na biologia de doenças metabólicas e inflamatórias, nas quais podem afetar a adiposidade, a sensibilidade à insulina e respostas associadas a citocinas, sem implicar desfechos clínicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR41 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FFAR3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FFAR3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FFAR3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR41.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FFAR3 para a investigação da sinalização de GPR41, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FFAR3 críticos para a função GPR41
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FFAR3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GPR41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GPR41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FFAR3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR41 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GPR41 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FFAR3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FFAR3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.