GPR39 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-427882

概要

Gpr39は、亜鉛を感知するGタンパク質共役受容体（GPCR）であるGPR39をコードしており、細胞内シグナル伝達カスケードの調節に関与して、細胞生存、分泌、炎症トーンを形作ることが示唆されています。マウスの系では、GPR39活性がcAMP依存性およびCa2+依存性の経路、ならびに下流のキナーゼシグナルの制御と関連づけられており、上皮バリア機能、神経シグナル伝達、代謝恒常性に影響することが報告されています。GPR39シグナルの変化は、代謝機能障害、消化管炎症、神経行動学的表現型などの文脈で研究されており、経路解析のための有用なノードとなっています。細胞膜受容体として細胞外からの刺激を転写・代謝の出力へと統合するGPR39は、in vivoおよび培養細胞において、GPCR駆動ネットワークを解明するための扱いやすい標的です。

GPR39 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGpr39遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gpr39内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gpr39のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR39タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR39シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gpr39欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR39の機能に不可欠なGpr39エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gpr39ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR39 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGPR39 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gpr39遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR39 HDRプラスミド（m）および GPR39 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGpr39ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGpr39標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。