Date published: 2026-7-16

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GPR105 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-431244-NIC

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데이터 시트
  • Target species: mouse
  • 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
  • GPR105 Double Nickase Plasmid (m) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
  • 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
  • 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
  • GPR105 더블 니케이스 플라스미드 (m) 및 GPR105 더블 니케이스 플라스미드 (m2)는 P2ry14을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
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    주문정보

    제품명카탈로그 번호 단위가격수량관심품목

    GPR105 더블 틈내기효소 플라스미드 (m)

    sc-431244-NIC
    20 µg
    $410.00

    GPR105 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2)

    sc-431244-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    마우스 P2ry14는 G 단백질 결합 수용체인 GPR105(P2Y14)를 암호화하며, 이는 UDP-포도당과 같은 UDP-당(UDP-sugars)에 의해 활성화되는 뉴클레오타이드 당 수용체로서 주로 Gi 신호전달에 결합합니다. GPR105가 활성화되면 cAMP 수준을 조절하고, 화학주성(chemotaxis), 사이토카인 생성, 선천면역 활성화를 형성하는 하위 경로에 영향을 줄 수 있으며, 골수계 세포 기능과 장벽 관련 염증에서의 역할도 보고되어 있습니다. 마우스 모델에서 P2ry14 활성은 염증 반응 및 대사 스트레스 신호전달과 연관되어 있어, 기도 및 장 염증, 지방조직 면역대사, 미세아교세포 관련 신경염증 과정 연구에 중요한 표적으로 여겨집니다. 세포외 뉴클레오타이드 대사와 면역 신호전달의 접점에 위치한 GPCR로서 P2ry14는 조직 항상성과 질병 관련 염증 회로에서의 퓨린성(purinergic) 조절을 규명하는 데 자주 활용됩니다.

    GPR105 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 P2ry14 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 P2ry14 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 P2ry14의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

    편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, P2ry14 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

    연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.