Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GPD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403706
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPD1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GPD1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GPD1 Anticorpo (E-7): sc-376219
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403706 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O GPD1 humano codifica a glicerol-3-fosfato desidrogenase 1 citosólica, uma enzima dependente de NADH que interconverte fosfato de di-hidroxiacetona e glicerol-3-fosfato, conectando a glicólise à síntese de glicerolipídeos e ao equilíbrio redox. Por meio de seu papel no shuttle do glicerol-fosfato e na geração de precursores de triglicerídeos/fosfolipídeos, o GPD1 influencia a homeostase citosólica de NAD+/NADH, o metabolismo energético e programas de armazenamento lipídico. Alterações na atividade de GPD1 têm sido associadas à remodelação metabólica no fígado e no tecido adiposo e são estudadas no contexto de dislipidemia, vias associadas à resistência à insulina e, de forma mais ampla, ao acoplamento redox mitocôndria–citosol. Essas funções tornam o GPD1 um ponto útil para investigar a partição do fluxo de carbono entre a glicólise e a biossíntese de lipídios sob estresse nutricional ou sinalização hormonal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPD1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GPD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GPD1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GPD1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPD1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GPD1 para a investigação da sinalização de GPD1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GPD1 críticos para a função GPD1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GPD1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GPD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GPD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GPD1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GPD1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GPD1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GPD1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GPD1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.