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glycogen synthase 2双切口酶质粒(h) | sc-402704-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
glycogen synthase 2双切口酶质粒(h2) | sc-402704-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GYS2 编码人类糖原合酶 2(glycogen synthase 2),这是肝细胞中负责延长糖原链的主要同工型,其作用机制是将葡萄糖从 UDP-葡萄糖转移到已有的糖原引物上。其活性通过依赖磷酸化的调控整合胰岛素与营养信号,从而使肝脏糖原储存与全身葡萄糖供给相协调。GYS2 在碳水化合物代谢通路中发挥作用,这些通路在糖原合成与糖原分解之间维持平衡,并在进食与禁食周期中与葡萄糖稳态紧密耦联。GYS2 依赖的糖原合成发生失调与多种代谢表型相关,例如肝脏糖原异常积累或耗竭;因此它也常在胰岛素抵抗及更广泛的代谢性疾病机制研究中被重点考察。
glycogen synthase 2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GYS2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GYS2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GYS2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GYS2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。