Plasmide Double Nickase (h) GLTSCR1: sc-409913-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GLTSCR1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GLTSCR1 Double Nickase (h) et le plasmide GLTSCR1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GLTSCR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GLTSCR1 Antibody (H-10): sc-515086
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GLTSCR1 | sc-409913-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GLTSCR1 | sc-409913-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLTSCR1 (glioma tumor suppressor candidate region gene 1) code une protéine nucléaire impliquée dans la régulation de processus associés à la chromatine et dans le contrôle transcriptionnel, ce qui concorde avec un rôle dans le maintien de programmes d’expression génique appropriés. Des interactions rapportées relient GLTSCR1 à des complexes et voies de régulation épigénétique qui influencent la progression du cycle cellulaire, les réponses aux dommages de l’ADN et les états de différenciation cellulaire. Une expression altérée de GLTSCR1 ou des perturbations génomiques ont été associées à des contextes tumoraux, en particulier dans des régions liées aux gliomes, ce qui appuie sa pertinence pour l’étude des mécanismes de reprogrammation transcriptionnelle oncogénique. En tant que gène humain, GLTSCR1 est fréquemment étudié dans des modèles explorant l’organisation nucléaire, la régulation de la chromatine et les relations génotype‑phénotype dans la biologie des maladies prolifératives.
GLTSCR1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GLTSCR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GLTSCR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GLTSCR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GLTSCR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.