Plasmide Double Nickase (h) GDPD3: sc-405288-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GDPD3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GDPD3 Double Nickase (h) et le plasmide GDPD3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GDPD3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GDPD3 | sc-405288-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GDPD3 | sc-405288-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GDPD3 (glycerophosphodiester phosphodiesterase domain containing 3) code une glycérophosphodiester phosphodiestérase putative impliquée dans le métabolisme des phospholipides et de la glycérophosphocholine, reliant le remodelage des lipides membranaires aux sorties de signalisation cellulaire. En influençant les niveaux de lysophospholipides et de métabolites apparentés, GDPD3 est susceptible de moduler des voies liées à la dynamique des membranes, aux seconds messagers lipidiques et à l’adaptation métabolique. Des programmes métaboliques lipidiques altérés sont fréquemment observés dans des états prolifératifs et de réponse au stress, faisant de GDPD3 un nœud utile pour étudier la régulation, par les lipides, de la croissance, de la survie et de la signalisation associée à l’inflammation. La dérégulation du renouvellement des phospholipides a été associée à des phénotypes de cancer et de maladies métaboliques, ce qui soutient l’exploration de GDPD3 dans des modèles cellulaires pertinents pour les maladies.
GDPD3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GDPD3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GDPD3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GDPD3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GDPD3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.