Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GCN2 Antibody (F-7) Alexa Fluor® 488: sc-374609 AF488. Direct fluorescent western blot analysis of GCN2 expression in MES-SA/Dx5 (A) and AN3 CA (B) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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GCN2双切口酶质粒(h): sc-402313-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GCN2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GCN2双切酶质粒（h）和GCN2双切酶质粒（h2）编码针对EIF2AK4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GCN2: sc-374609，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GCN2双切口酶质粒(h) | sc-402313-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GCN2双切口酶质粒(h2) | sc-402313-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 EIF2AK4 编码 GCN2，这是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，可通过与未氨酰化 tRNA 结合感知氨基酸匮乏，并磷酸化 eIF2α 以启动整合性应激反应（ISR）。该信号通路会降低整体蛋白翻译水平，同时促进应激适应性转录本的选择性翻译，从而将营养可用性与蛋白质稳态、自噬以及代谢重编程相耦联。GCN2 整合来自氨基酸饥饿及其他细胞应激的输入，调控 ATF4 依赖的转录程序，并与 mTORC1 和炎症信号发生串扰。文献报道 EIF2AK4/GCN2 活性失调与应激耐受性改变、免疫细胞功能以及代谢失衡相关，使其成为研究应激适应通路机制的重要节点。
GCN2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EIF2AK4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EIF2AK4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EIF2AK4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EIF2AK4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。